产品货号:
MT0083
中文名称:
TEV蛋白酶
英文名称:
TEV Protease
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,它可特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。TEV蛋白酶经6XHis标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(货号:MT0081)去除。本制品主要用于融合蛋白标签剪切去除。
在1×TEV Buffer,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
重组表达的SUMO-TEV-Y融合蛋白经rTEV酶切后去除SUMO融合标签。
M:Protein Marker;
泳道1:纯化后的SUMO-TEV-Y蛋白;
泳道2:1μL TEV蛋白酶酶切1h产物;
泳道3:1μL TEV蛋白酶酶切3h产物。
组分 | 规格 |
TEV Protease(10U/μL) | 100μL |
20×TEV Buffer | 1mL |
0.1M DTT | 100μL |
保存:-20℃可储存6个月。
TEV酶在4℃~30℃温度、pH范围(6.0~8.5)反应条件下均具有活性(见下表)。
不同温度下剪切活性(%) | ||||
4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
0.5h | 34 | 58 | 56 | 70 |
1h | 58 | 80 | 78 | 90 |
2h | 71 | 99 | 99 | 99 |
3h | 84 | 99 | 99 | 99 |
- 在EP管中配制如下反应体系:
成分 用量 融合蛋白 20μg 20×TEV Buffer 7.5μL 0.1M DTT 1.5μL TEV蛋白酶 1~3μL ddH2O 至150μL - 30℃孵育,在1、2、4、6小时分别吸出30μL上述反应液,置于单独的EP管中。
- 向上述EP管中加入30μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
- 样品全部反应完毕后,样品煮沸5分钟,取40μL进行SDS-PAGE分析。
- 如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,请延长反应时间,并增加TEV蛋白酶用量。
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